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華西都市報(bào)記者肖茹丹實(shí)習(xí)生趙詩柯

懸疑 家養(yǎng)山羊?野生斑羚?剝皮去骨之后兩難分

求助 DNA鑒定，憑火柴頭大小的肉丁確定是什么

一次典型DNA實(shí)驗(yàn)

檢測(cè)儀器：恒溫水浴鍋高速冷凍離心機(jī)PCR儀等

實(shí)驗(yàn)方法：酚氯仿經(jīng)典法DNA抽提

實(shí)驗(yàn)單位：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模捍_定被肢解的動(dòng)物種類

去年12月的一天，陽光撥開密林照到山間小溪，兩名男子蹲坐四川省綿竹市金花鎮(zhèn)三江村一處山溝，將獵捕來的兩只野生動(dòng)物剝皮、肢解。

兩人以為，這樣一來，只要咬定這是兩只普通的山羊，就能掩人耳目。他們沒想到的是，警方將兩人擋獲，隨即將動(dòng)物尸體送檢。四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室通過DNA鑒定實(shí)驗(yàn)，從一塊小肉丁，到提取DNA，再到數(shù)據(jù)庫比對(duì)，最終確定兩只被剝皮的動(dòng)物是斑羚，為國家二級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物。

目前，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，兩人因涉嫌非法獵捕、殺害珍貴瀕危野生動(dòng)物，已移交綿竹市檢察院起訴。

辦案僵局/

村民獵殺斑羚 剝皮肢解掩耳目

去年12月14日，家住什邡市和綿竹市交界的李林約好友王強(qiáng)一起上山采藥，走在山間小徑上，草叢中的糞便和腳印引起了他們的注意。李林走近一瞧，這組腳印形似剪刀，和家養(yǎng)山羊的腳印頗為相似。

“逮兩只回去吃!”兩人不謀而合。隨即，王強(qiáng)拿出隨身攜帶的繩子，挽成圈，做成了三個(gè)圈套，并用雜草覆蓋，引“羊”入套。

三天后，兩人再次相約上山，查看三個(gè)圈套中有無獵物。上山后，他們遠(yuǎn)遠(yuǎn)地看到圈套位置有兩只動(dòng)物，已經(jīng)死亡。尸體皮毛呈灰色，形似山羊，但四肢比較粗短，角也比較長(zhǎng)。李林和王強(qiáng)把“獵物”裝進(jìn)尼龍袋里。

下山途中，兩人商議將皮子剝了，既方便搬運(yùn)，又能掩人耳目。在一處山溝，兩人用彎刀將尸體剝皮、肢解，并將犄角等扔在了現(xiàn)場(chǎng)。讓他們沒想到的是，兩人剛下山，就撞上了正在巡邏的綿竹市公安局金花鎮(zhèn)派出所民警，肢解的動(dòng)物尸體現(xiàn)場(chǎng)被扣押，并移交給了綿竹市森林公安。

據(jù)兩人事后交代，他們當(dāng)時(shí)已經(jīng)意識(shí)到獵捕的這兩只動(dòng)物可能是保護(hù)動(dòng)物，但因?yàn)槠っ淮妗⒀饽：瑑扇艘豢谝Фㄟ@只是普通的山羊。警方為確定這兩只動(dòng)物的具體種類，綿竹市森林公安只得按程序做DNA鑒定實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)求證/

火柴頭大小“肉丁” 提取DNA沉淀物

兩只動(dòng)物尸體被送往了四川楠山林業(yè)司法鑒定中心，隨即被轉(zhuǎn)送至四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院的實(shí)驗(yàn)室做DNA鑒定實(shí)驗(yàn)。

在做好了實(shí)驗(yàn)前的無菌準(zhǔn)備后，實(shí)驗(yàn)人員從動(dòng)物腿部剪下一塊火柴頭大小的肉丁，剪碎成末，倒入裝有生理鹽水的離心管中進(jìn)行浸泡清洗，又加入了細(xì)胞裂解緩沖液等試劑，用以分解細(xì)胞，消化部分蛋白質(zhì)。四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院徐懷亮教授說，細(xì)胞中的DNA是與蛋白質(zhì)、糖類等其他物質(zhì)混雜在一起，為了純化DNA，必須去除蛋白質(zhì)。

接下來，實(shí)驗(yàn)人員將離心管置入恒溫水浴鍋里過夜。第二天，實(shí)驗(yàn)人員又將事先調(diào)配好的酚氯仿混合溶液滴入離心管中。如此一來，即可去除細(xì)胞中不需要的糖類、蛋白質(zhì)等，只留下DNA。

接下來，在離心機(jī)的高速運(yùn)轉(zhuǎn)下，管內(nèi)出現(xiàn)了“兩極分化”：上層是清液，下層是沉淀物。反復(fù)多次分離實(shí)驗(yàn)后，再經(jīng)過酒精、冷凍、離心機(jī)分層等步驟，管底出現(xiàn)了一些白色沉淀物——這就是DNA。最后，實(shí)驗(yàn)人員將上層清液吸出，在室溫環(huán)境中靜置30分鐘，等酒精揮發(fā)3個(gè)小時(shí)，就是純化后的DNA。

數(shù)據(jù)庫比對(duì)

“獵物”確為二級(jí)保護(hù)動(dòng)物

提取到最終的DNA后，實(shí)驗(yàn)人員又對(duì)其加入滅菌水溶解，放進(jìn)冰箱保存?zhèn)溆谩６笸ㄟ^專業(yè)的檢測(cè)儀器，將一個(gè)小小的DNA片斷擴(kuò)增至1000萬倍以上制成數(shù)據(jù)。在經(jīng)過序列測(cè)定獲得DNA序列后，與已有的數(shù)據(jù)庫比對(duì)。最終確定李林和王強(qiáng)所捕殺的“野羊”是國家二級(jí)重點(diǎn)野生保護(hù)動(dòng)物斑羚。

“DNA片斷上都搭載著每個(gè)物種獨(dú)一無二的信息，就像動(dòng)物的身份證，因此一根頭發(fā)甚至一個(gè)細(xì)胞就可以完成DNA的鑒定工作，”徐懷亮透露，目前四川農(nóng)大生命科學(xué)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室的DNA數(shù)據(jù)庫有數(shù)百種動(dòng)物資料，包括大熊貓、金絲猴、黑熊、綠尾虹雉、紅腹錦雞等多種珍稀動(dòng)物。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，最終確定兩只被剝皮的是斑羚，為國家二級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物。李林和王強(qiáng)也因涉嫌非法獵捕、殺害珍貴瀕危野生動(dòng)物罪，移交綿竹市檢察院起訴。(文中犯罪嫌疑人為化名)

DNA鑒定，為何神準(zhǔn)

“DNA片斷上都搭載著每個(gè)物種獨(dú)一無二的信息，就像動(dòng)物的身份證，因此一根頭發(fā)甚至一個(gè)細(xì)胞就可以完成DNA的鑒定。”——四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院徐懷亮教授

延伸閱讀/

“毀容”逃不出DNA“火眼”

四川楠山司法鑒定中心負(fù)責(zé)人應(yīng)曉峰透露，鑒別動(dòng)物主要分為外形甄別和DNA鑒定。一些不法分子自以為破壞外觀可以逃避法律制裁，但實(shí)際上DNA鑒定已成為多起非法獵捕、販賣野生保護(hù)動(dòng)物案件中的有力證據(jù)。

據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，每年四川農(nóng)大生命科學(xué)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室接收的動(dòng)物DNA鑒定就多達(dá)十幾起，幾乎都與省內(nèi)的非法獵捕野生保護(hù)動(dòng)物案件相關(guān)：2015年森林公安送來一具動(dòng)物尸體的肌肉組織，最終鑒定出是國家一級(jí)重點(diǎn)野生保護(hù)動(dòng)物羚牛;前幾年，地方動(dòng)物園送來一批被盜的動(dòng)物骨頭，把骨髓取樣，用類似的提取方法，最終確認(rèn)為東北虎。

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