王祖賢,1967年1月31日生于臺灣臺北。1984年,王祖賢在臺主演了電影處女作《今年的湖畔會很冷》,同時該片入圍金馬獎,之后簽約香港邵氏電影公司并放棄了國光藝校的學業。2001年前后,王祖賢接受臺灣中天衛視《真情指數》欄目,蔡康永專訪,詳述了她少年時代并不順遂的求學生涯、以及無意間踏入光影世界的經歷。1985年2月《再見七日情》上映,王祖賢在香港的演藝生涯正式開始。
2003年3月21日,齊秦在北京首都體育館舉辦春分演唱會,尾聲時大屏幕上放出了王祖賢在加拿大拍攝的問候視頻。2003年,制片人、湯臣老板徐楓女士邀請王祖賢主演內地班底影片《美麗上海》,這是王祖賢電影生涯的告別之作,她在其中飾演一位在美國工作的上海大家庭的女兒,職業是電子工程師。王祖賢息影前最后一部電影《美麗上海》曾于2004年參展光州電影節,但王祖賢沒有出席該活動。